Справочники
Аналитика | Документы | Должностные обязанности | Справочники | Должностные инструкции | Положение по отделам | Словарь терминов
Ветеринария / Диагностикумы и наборы для диагностики заболеваний с/х животных / Наборы для экспресс-диагностики инфекционных болезней плотоядных иммунохроматографическим методом
Возможности иммунохроматографического метода выявления туберкулеза
ВОЗМОЖНОСТИ ИММУНОХРОМАТОГРАФИЧЕСКОГО МЕТОДА ВЫЯВЛЕНИЯ ТУБЕРКУЛЕЗА А. В. КАРПОВ, Н. Д. ЗАДУБРОВСКАЯ, В. Н. ЕВДОКИМОВ Новгородское областное государственное учреждение здравоохранения "Фтизиатрия", кафедра специализированной терапии Новгородского государственного университета им. Ярослава Мудрого Принятые в настоящее время методы выявления туберкулеза, такие как флюорографическим, микробиологические, особенно метод прямой микроскопии мазка мокроты по Цилю-Нильсену, способны выявить значительное число больных активным бациллярным туберкулезом легких. Разрешающая способность перечисленных методов колеблется от 30 до 70% [6]. Однако, как показывает практика, не все формы легочного туберкулеза можно выявить указанными способами. В первую очередь ограничена возможность выявления так называемых малых форм туберкулеза легких и прежде всего очагового, который до сих пор в структуре первичной заболеваемости составляет от 17 до 20%. Среди больных очаговым туберкулезом только 1/3 выделяет микобактерии туберкулеза (МВТ), а число пропусков патологии при флюорографии составляет от 17 до 35%. Это связано с малыми размерами, нетипичным расположением очага или инфильтрата, неправильной интерпретацией результатов исследования и техническим браком при производстве флюорографии [б, 8]. Более редко аналогичная ситуация возникает и при других формах туберкулеза легких, таких как туберкулемы, инфильтративная и диссеминированная формы. Поэтому в ряде ситуаций своевременная диагностика туберкулеза легких значительно затягивается, особенно при дообследовании, так называемом контроле патологии, от 1,5 до б мес. и более [4]. В результате в ряде случаев диагноз туберкулеза устанавливается морфологически при экстренных и плановых операциях по поводу воспалительных или онкологических заболеваний легких или у умерших от туберкулеза, но неизвестных диспансеру. По Новгородской области процент таких больных возрастает с каждым годом от 1,7 в 1994 г. до 3,5 в 1999 г. Существует необходимость своевременного и регулярного обследования на туберкулез в изолированных коллективах, в частности в следственных изоляторах, учреждениях исполнения наказания (УИН), воинских частях, но не всегда эта необходимость может быть реализована с помощью флюорографии. Поэтому в этих учреждениях могут быть приняты иные методы выявления туберкулеза, в частности микроскопия. В силу вышесказанного разработка современных тестов, позволяющих быстро и достоверно установить наличие туберкулеза легких, а также степень его активности, остается важнейшей проблемой медицины [1, 3]. В последние годы многие исследователи и практики противотуберкулезных учреждений России стали использовать иммуноферментный анализ (ИФА) сыворотки крови на наличие в ней противотуберкулезных антител (ПТАт) в качестве диагностического теста на наличие туберкулезной инфекции в организме и степени се активности [2, 4|. Вопросы, связанные с применением ИФА для диагностики туберкулеза легочных локализации, достаточно широко освещены в работах отечественных и зарубежных ученых и практиков [б, 7, 9|. Вместе с тем существует проблема унификации иммунологических исследований на туберкулез и совершенствования качества и эффективности тест-систем по таким аспектам, как индивидуализация использования, специфичность и чувствительность метода, т. с. необходимо постоянное совершенствование существующих и создание новых тест-систем для диагностики туберкулеза. Задачей настоящего исследования являлись клиническая апробация иммунохроматографичского набора реагентов (ИХНР) для выявления антител к МВТ, сокращенно именуемого "иммунохром-анти-МТ-экспрссс", производства Московской компании "Прогрессивные Био-Медицинские Технологии". а также сравнение его с классической тест-системой ИФА на твёрдофазной основе производства Института им. Пастсра Санкт-Петербурга. Работа основана на обследовании 168 пациентов в возрасте от 18 до 63 лет, направленных в областной противотуберкулезный диспансер с 15.04 по 24.09.99. В ходе эксперимента обработаны три группы наблюдения: к 1-й группе отнесено 80 стационарных больных с различными формами активного туберкулеза легких; ко 2-й группе — 68 пациентов из групп диспансерного учета, которая обследовалась амбулаторно, и к 3-й группе — 20 больных с неспецифическими заболеваниями легких, которые находились в лечебно-диагностическом отделении с подозрением на туберкулез органов дыхания. Среди 1-й группы с очаговой формой зарегистрировано 12 больных, с инфильтративной — 52, с диссеминированной – 11 и с фиброзно-кавернозной — 5. Во 2-й группе IA группа диспансерного учета составила 6 человек, II группа — 10, IIIA — 14 и VIIA - 8. В 3-й группе из 20 больных у 7 имел место хронический бронхит в стадии обострения, у 3 — острый бронхит, у 6 — саркоидоз легких и у 4 — пневмония. Методика проведения тестирования методом иммунохроматографического анализа ПТАт определяются как в сыворотке, так и в плазме и цельной крови. Перед определением освобождается стрип-плашка от герметичной упаковки. Палец исследуемого необходимо продезинфицировать стерильной салфеткой, проколоть стерильным скарификатором и выдавить 2 капли крови в окошко А пли же в это окошко добавить одну каплю сыворотки (плазмы)- Затем приданной к тест-набору пипеткой добавить точно 5—6 капель растворителя в окошко А. Экспозиция составляет 10—15 мин при комнатной температуре (свыше 15 мин результат теста оценивать нельзя). Контролем для сравнения является окошко С, где появляется одна окрашенная полоска светло-фиолетового цвета. Оценка ответов оценивается по окошку В: отсутствие видимой полоски светло-фиолетового цвета — ответ отрицательный; появление полоски в окошке В — ответ положительный. Таблица 1 Результаты испытаний иммуноферментного и иммунохроматографического методов диагностики туберкулёза Клиническая группа Число больных (n) Количество положительных ответов метода и их процент Иммуноферментного Иммиунохроматографического абс. % абс. % А. Неспецифические заболевания лёгких 20 3 15,0 ± 7,98 2 10,0 ± 6,71 Б. Активный туберкулёз 80 49 61,3 ± 5,45 49 61,3 ± 5,45 в том числе: Очаговый 12 5 41,7 ± 14,2 2 16,7 ± 10,8 Инфильтративный 52 31 59,6 ± 6,81 35 67,3 ± 6,51 Диссеминированный 11 8 72,7 ± 13,4 7 63,6 ± 14,5 Фиброзно-кавернозный 5 5 100,0 5 100,0 Таблица 2 Эффективность методов среди больных туберкулёзом, находящихся на диспансерном учёте Группа диспансерного учёта Число больных (n) Количество положительных ответов метода и их процент Иммуноферментного Иммиунохроматографического n(+) % n(+) % IA 6 4 - 4 - II 10 5 50,0 4 40,0 IIIA 14 5 35,7 3 21,5 VIIA 8 8 21,1 4 10,5 Методика исследования с помощью классической системы ИФА на твердофазной основе достаточно хорошо известна и поэтому здесь не приводится. Результаты клинической апробации иммуноферментного и иммунохроматографического анализов у больных туберкулезом и неспецифическими заболеваниями легких приведены в табл. 1. Как видно из табл. 1, классический иммуноферментный и иммунохроматографический анализы сыворотки крови на наличие ПТАт по своей результативности не отличается друг от друга (Т - во всех случаях меньше табличного значения и ошибка больше 5%). Показатели реакций ИФА и ИХНР, отражающие содержание ПТАт в сыворотке крови, существенно (достоверно) выше у больных туберкулезом, чем у больных с неспецифическими заболеваниями легких (соответственно 15 и 10%). Параллельное обследование двумя методами больных с неспецифическими заболеваниями легких показало низкий процент положительных ответов как по иммуноферментному, так и по иммунохроматографическому методам (соответственно 15 и 10%). При туберкулезе специфичность ИФА составила 85%, а иммунохроматографического метода — 90%. Результаты апробации иммуноферментного и иммунохроматографического методов выявления в сыворотке крови ПТАт у больных, состоящих в различных группах диспансерного наблюдения (закончивших стационарное лечение), отражены в табл. 2. В силу малого числа наблюдений статистическая обработка этого материала не произведена, однако визуальных и достоверных различий по частоте обнаружения ПТАт в сыворотке крови при постановке реакции ИФА и набором реагентов "иммунохром-анти-МТ-экспресс" в этой группе больных не установлено. При анализе результатов обследования данными методами больных, закончивших стационарное лечение и находившихся на диспансерном учете, отмечена более низкая частота выявления ПТАт иммунохроматографнческим методом по сравнению с иммуноферментным. Таким образом, проведенное исследование продемонстрировало высокую эффективность методов определения ПТАт в сыворотке крови в комплекс-ном обследовании больных с легочной патологией, особенно при верификации диагноза туберкулеза легких. Выводы ПТАт методом непрямого твердофазного ИФА и методом иммунохроматографии обнаружены у больных активным туберкулезом легких в 61,3% случаев, при нетуберкулезной патологии легких — соответственно в 15 и 10%. Специфичность метода ИФА на твердофазной основе составила 85%; специфичность иммунохроматографического метода, проводимого набором реагентов "иммунохром-анти-МТ-экспрссс", — 90%. Определение ПТАт в сыворотке крови является важным компонентом комплексной диагностики обследования больных туберкулезом легких. Для более достоверного суждения о методе иммунохроматографии желательно расширить число обследованных больных и апробировать данный метод у лиц, имевших положительный ответ ИФА, но с необнаруженными признаками туберкулеза.
Похожие записи этой же категории
| Имуномодуляторы. миксоферон | ||
| Миксоферон – отечественный иммуномодулятор | ||
| Гормональные препараты магэстрофан® | ||
| Гормональные препараты.окситоЦин | ||
Другие статьи этой категории